P19-10 : 低温環境下でのA重油分解菌の挙動と分解能の評価

櫻井 琢磨¹,杉山 賢吾¹,岩間 映月²,新谷 政己¹,金原 和秀¹
1静大院・工・化学バイオ, 2静大・工・物質工
油汚染環境の浄化手法として，微生物を利用したバイオレメディエーションは，これまでに広く研究されている．しかし多くの場合，温度条件が25-30℃に設定されており，必ずしも汚染環境の実情を反映していない．そこで本研究では，油分解菌を用いて，低温環境下におけるA重油の分解能の評価を行った． 油分解菌Rhodococcus erythropolis A株を，1/3LB液体培地を5 mL入れた試験管に植菌し，30℃，120 rpmで48 h培養したものを前培養液として用いた．200 mL蓋付きフラスコにW培地を100 mL，前培養した培養液（OD₅₉₅ = 0.9）を1 mL接種し，A重油を終濃度500 mg/Lになるよう添加した．これを10℃または15℃，120 rpmで振盪培養した．培養開始から0，3，6，9，12日目にサンプルをGC-FIDにて測定して,油の分解評価を行った。 A重油存在下，低温で培養すると，白く細い形状の凝集体が，培養3日目から観察され，9日目には小さなペレット状のものが観察された．また凝集体をSYBR^® Greenにて染色後，蛍光顕微鏡で観察したところ，細胞の形状に蛍光をした認められたのため，この凝集体は菌体の集合体であると考えられた．A重油の残存量を測定したところ，10℃または15℃いずれの温度条件でも，12日間の培養で，85％以上が分解されていた．なお，菌体を加えていないサンプルでは分解が認められず，A重油の揮発は生じなかったことが示唆された．現在は乾燥重量測定法を用いて，凝集体に含まれる菌体量の測定と，分解速度との相関について検証を試みている．

keywords:bioremediation,low temperature,A-fuel oil,aggregate,