P19-14 : Burkholderia multivoransATCC17616株のクロロ安息香酸トランスポーター様遺伝子群の多重遺伝子破壊株の構築と解析

本田 悦爾¹,町田 峻太郎²,戸倉 由貴¹,津田 雅孝³,小川 直人¹
1静大院・農, 2静大・農・共生バイオ, 3東北大院・生命科本研究では、多様な芳香族化合物を分解できるBurkholderia multivorans ATCC17616株のトランスポーター様遺伝子群の解析を行い、従来知見が少ない微生物の芳香族化合物取り込みに関する知見を得ることを目的とする。同株のbenK2, benK3, benK4遺伝子は、既知の安息香酸トランスポーター遺伝子benK（Acinetobactor baylyi ADP1株）及び3-クロロ安息香酸（以下3-CB）トランスポーター遺伝子benP (Cupriavidus necator JMP134株)とアミノ酸レベルで高い相同性（26~73%）をもつことから、これらの取り込みに関与する可能性が考えられる。これまでの研究で、benK2, benK3, benK4各遺伝子の単独遺伝子破壊株および多重遺伝子破壊株を作製して生育試験を行った結果、三重遺伝子破壊株では3-CB液体培地での生育速度が、野生株よりもわずかに遅い傾向が見られたものの、遺伝子破壊による生育の顕著な差はなかった。この結果から複数の遺伝子が機能を補完し合っており、遺伝子破壊により各トランスポーター遺伝子の発現の程度が変わる可能性を考えた。まず野生株の各遺伝子の発現を逆転写PCRにより解析した結果、benK3遺伝子は構成的に発現し、benK4遺伝子は3-CBにより誘導発現することが示された。今後さらに、生育試験をより詳細に行い、野生株と各遺伝子破壊株のbenK2, benK3, benK4各遺伝子の発現パターンの比較等を行って各遺伝子の3-CB取り込みへの寄与を調べる。

keywords:バイオレメディエーション,トランスポーター,Burkholderia multivorans,,