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富田 順子 1（株）テクノスルガ・ラボ 【目的】次世代シークエンサーを用いた解析では、近年、解析できる塩基長が伸びている（現在、イルミナMiSeq では600bp）。解析に使用できる領域の選択肢が増えることで、「微生物群集構造解析においてどの解析領域を使用するのが目的のサンプルに適しているのか？」という疑問を多くの人が持つであろう。そこで、本研究ではMiSeqを用いて、解析領域が様々なサンプルの帰属分類群の推定に及ぼす影響を検討した。【方法】５種類のサンプル（糞便、唾液、土壌、活性汚泥、河川水）からDNAを抽出し、一般細菌16SrDNA対象のユニバーサルプライマー

高橋 俊輔1,富田 順子1,久田 貴義1,西岡 かおり1 1(株)テクノスルガ・ラボ 【目的】近年、次世代シークエンサーの導入により解析可能な塩基配列数が飛躍的に増加し、多検体の同時解析が可能となった。しかし、多検体の同時解析には、多くのプライマーを合成しなくてはならず、初期コストの増加につながる。現在、イルミナMiSeqを用いた解析では、Dual Indexプライマーを用いることにより、プライマー合成コストを抑制することが可能である。さらに、イルミナより、Index PCR法（2 Step PCRによるIndexの付与）がリリースされた。Index PCR法を用

末永 光1,水田 志織1,宮崎 健太郎1,矢追 克郎1 1産総研・生物プロセス 【目的】 産業用酵素の供給源の多くは微生物であるが、環境中の微生物の大部分は培養困難という従来の微生物スクリーニング法の限界を受け、遺伝子資源探索にメタゲノム手法が導入された。以降、メタゲノム手法の優位性を示す多数の報告があるものの、その多くは16S rRNA遺伝子配列に基づく系統学的な解析であった。そこで本研究においては、実際に活性を保有する酵素遺伝子を機能スクリーニングにより取得し、環境中からの遺伝子資源取得という目的において、メタゲノム手法は微生物培養法を凌駕するのか（しないのか

Tourlousse Dieter Maurice1,大橋 明子1,野田 尚宏1,関口 勇地1 1産総研・バイオメディカル Massively parallel sequencing of 16S rRNA (16S) gene amplicons has become a cornerstone technique for determining the composition and structure of complex microbial communities in natural and engineered ecosystems. However,

髙木 雄貴1,Parasuraman Swath3,常田 聡3,金田一 規智1,大橋 晶良1,村上 千穂2,青井 議輝2 1広島大・院・工・社会基盤環境工, 2広島大・サステナセンター, 3早稲田大・理工学術院・生命医科学 環境中の微生物の99％以上は現在の培養技術では分離培養できない、いわゆる難培養性である。そもそもこの現象は、一般的な平板培養において植菌した細胞数に対して１％以下のコロニーしか形成しない、という現象に基づいて表現されていることでもある。一方で、本来その事実は微生物学において本質的に重要な課題であるにもかかわらず、なぜほとんどの微生物はコロニーを

金子 雅紀1,高野 淑識1,大河内 直彦1,木村 浩之2 1海洋研究開発機構, 2静岡大・理・地球科学 メタン生成は海底下など，還元的な堆積物中における主要な代謝経路の１つであるため，地球表層の炭素循環および，地下生命圏の広がりを理解する上で重要なプロセスである。しかしながら，メタン生成アーキアの分布および活動の理解は断片的にしか進んでいない。特に，海底堆積物深部では，地上との大きな環境落差，複雑な夾雑物成分，低いバイオマスと活性などにより，メタン生成アーキアの定量化は極めて困難である。 　そこで，我々は新しい方法論として，メタン生成補酵素F430の超高感度定量分

牛木 章友1,藤谷 拓嗣1,星野 辰彦2,常田 聡1 1早稲田大・先進理工学・生命医科学, 2海洋研究開発機構・高知コア研 【背景・目的】亜硝酸酸化細菌（Nitrite-Oxidizing Bacteria：NOB）は亜硝酸を硝酸に酸化する独立栄養細菌であり、環境中における窒素循環の一部を担っている。環境中に生息するNOBの菌叢は、一般的に16S rRNA遺伝子に基づくFISH、シーケンシングによって解析されている。しかし近年、既存のNOB系統とは異なる新規なNOBが機能遺伝子をターゲットとした研究により発見されており、系統が未知のNOBが潜在している。本研究では

横山 和平,藤田 大介1,藤本 博子1 1山口大・農 農耕地は亜酸化窒素（N2O）の主要な排出源のひとつとして考えられており、亜酸化窒素還元酵素（N2OR）を持つ土壌脱窒菌によるN2への還元がいくつかの研究で試みられている。しかしながら、実際に土壌中で活性なN2ORを発現している脱窒菌群の特定には至っていない。土壌から活性状態のN2ORタンパク質が分離できれば、実際に活性なN2ORを発現している脱窒菌群を特定することが可能である。本研究では、NativeなN2ORの二次元電気泳動条件について検討したので、途上であるが、その一部を報告する。材料及び方法：ペリプラズム

品川 勝1,阿部 勝正1,高橋 祥司1,解良 芳夫1 1長岡技科大・院・工 酵母Lipomyces starkeyiは菌体乾燥重量の60～80%に達する油脂を蓄積することが可能な油脂生産蓄積酵母である。本酵母が生産する油脂は，食用油やバイオディーゼル燃料の原料としての利用が期待されている。本酵母は木材成分であるグルコースなどの六炭糖だけでなく，アラビノースやキシロースなど五単糖も利用できることから，特に未利用バイオマスからの油脂生産が期待されている。しかし，本酵母による油脂生産の実用化には，油脂生産能の強化などの解決すべき課題が多く残っており，遺伝子改変による生産

Mustapha Nurul Asyifah1,Ishida Natsumi2,Maeda Toshinari1,Tashiro Yukihiro2,Sakai Kenji2,Shirai Yoshihito1 1Department of Biological Functions Engineering, Graduate School of Life Science and Systems Engineering, Kyushu Institute of Technology, 2Department of Applied Molecular Microbio